康寧基質(zhì)膠說明書

前言：

細(xì)胞在康寧Matrigel基質(zhì)這種原始且可靠的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)上表現(xiàn)出良好的性能。

近30年前，研究人員一直在尋找促進(jìn)小鼠肉瘤細(xì)胞生長的方法。最終的解決方案就是：康寧Matrigel基質(zhì)，其為分離自Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物，該腫瘤富含ECM蛋白，如層粘連蛋白(主要成分)、IV型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多種生長因子。

如今，這種基于ECM的天然水凝膠是使用zui廣泛的體外2D和3D細(xì)胞培養(yǎng)模型，可使您：

1、改善正常和轉(zhuǎn)化的貼壁依賴性上皮細(xì)胞以及其他類型細(xì)胞的粘附和分化。

2、更好地模擬體內(nèi)環(huán)境，適用于2D和3D細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。

應(yīng)用

康寧Matrigel基質(zhì)可有效促進(jìn)正常和轉(zhuǎn)化的貼壁依賴性上皮細(xì)胞以及其他類型細(xì)胞的粘附和分化，包括神經(jīng)元、支持細(xì)胞、雞晶狀體、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及肝細(xì)胞。

康寧corning代理——天津益元利康生物科技有限公司

一、康寧基質(zhì)膠介紹：

康寧Matrigel基質(zhì)是分離自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物，該腫瘤富含細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，包括層粘連蛋白 (主要成分)、IV型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多種生長因子。

1.質(zhì)量

通過小鼠抗體產(chǎn)物 (MAP) 檢測進(jìn)行常規(guī)小鼠菌落病原體篩選

對(duì)包括LDEV在內(nèi)的多種病原體進(jìn)行廣泛的PCR檢測，確保對(duì)生產(chǎn)過程中使用的原材料實(shí)施嚴(yán)格控制

細(xì)菌、真菌和支原體檢測均為陰性

通過Lowry方法測定蛋白濃度

通過鱟阿米巴樣細(xì)胞溶解物試驗(yàn)測定內(nèi)毒素水平

在37℃下進(jìn)行14天康寧Matrigel基質(zhì)凝膠穩(wěn)定性測試

利用神經(jīng)軸突生長試驗(yàn)測定各批次的生物活性。將雞背根神經(jīng)節(jié)接種到1.0mm厚的康寧Matrigel基質(zhì)上，48小時(shí)后，在未添加神經(jīng)生長因子的情況下，神經(jīng)軸突生長試驗(yàn)需呈陽性反應(yīng)

2.來源

Engelbreth-Holm-Swarm小鼠腫瘤

制備和儲(chǔ)存 置于-20℃下保存。避免反復(fù)凍融。切勿儲(chǔ)存于無霜冰箱內(nèi)。冷凍保存。

二、康寧Matrigel基質(zhì)膠應(yīng)用領(lǐng)域

● 影響成年大鼠肝細(xì)胞基因表達(dá)

● 小鼠和人乳腺上皮細(xì)胞3D培養(yǎng)

● 體內(nèi)外周神經(jīng)再生

● 代謝和毒理學(xué)研究

● 腫瘤細(xì)胞侵襲試驗(yàn)

● 體外和體內(nèi)血管生成研究

● 人類腫瘤在免疫抑制小鼠體內(nèi)擴(kuò)增

● 人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞 (hiPSc) 維持

● hiPS細(xì)胞的神經(jīng)元分化 

三、康寧基質(zhì)膠型號(hào)列表及如何選擇

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四、常見問題解答

? Matrigel到貨需要注意什么？
首先確認(rèn)是否由干冰運(yùn)輸，到貨時(shí)包裝箱中干冰是否足量，查看Matrigel液面是否基本水平，以及瓶身側(cè)壁、瓶口有無Matrigel融化的痕跡，以確保運(yùn)輸質(zhì)量；若發(fā)現(xiàn)問題，請(qǐng)及時(shí)拍照記錄，并聯(lián)系經(jīng)銷商反饋。
? 如何儲(chǔ)存Matrigel？
收到產(chǎn)品并確認(rèn)到貨情況無異常后，請(qǐng)將Matrigel儲(chǔ)存于-20℃冰箱，長期保存可置于-80℃冰箱。切勿將Matrigel儲(chǔ)存于自動(dòng)除霜的冰箱中。在第一次融化后請(qǐng)分裝保存，應(yīng)避免Matrigel反復(fù)凍融。
? Matrigel顏色為什么會(huì)有不一樣？
無酚紅Matrigel沒有顏色，融化后應(yīng)是透明的；
含酚紅Matrigel顏色可以在明黃色至暗紅色之間變化，這些顏色變化是正常現(xiàn)象。因?yàn)榉蛹t存在時(shí)，在溫度、pH不同的情況下液體會(huì)出現(xiàn)顏色的差異。

? 如何分裝Matrigel？
建議根據(jù)您一次的使用量做小量分裝，。請(qǐng)注意與Matrigel接觸的所有耗材如槍頭、管子均需事先預(yù)冷，且在冰上無菌操作。分裝后的Matrigel可保存在-20℃或-80℃冰箱。建議保留瓶子的標(biāo)簽或記錄下貨號(hào)（Catalog Number）及批次號(hào)（LOT number），以便后續(xù)查詢追蹤相關(guān)信息。 
? Matrigel融化時(shí)發(fā)現(xiàn)有凝膠，融化不了是怎么回事？
Matrigel對(duì)溫度非常敏感，超過10℃即開始成膠，超過22℃成膠速度會(huì)更快。如果到貨情況正常，出現(xiàn)此種現(xiàn)象應(yīng)該是融化操作不規(guī)范或者融化期間環(huán)境溫度升高導(dǎo)致部分凝膠。請(qǐng)一定嚴(yán)格按照融化操作規(guī)范執(zhí)行，確保融化時(shí)保持低溫環(huán)境。
? 如何稀釋Matrigel？
一般可用預(yù)冷的無血清培養(yǎng)基或pH7.4的PBS稀釋。由于批次之間的濃度差異，除354277外，推薦按照特定的工作終濃度稀釋，而不要以比例或稀釋倍數(shù)稀釋。
? Matrigel使用濃度？

凝膠濃度：在需要Matrigel凝膠的實(shí)驗(yàn)中，工作濃度需大于3 mg/mL

包被濃度：包被實(shí)驗(yàn)時(shí)Matrigel無需成膠，因此包被濃度應(yīng)小于凝膠濃度（即3mg/mL）

工作濃度需要根據(jù)具體的細(xì)胞類型進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)測試。對(duì)于侵襲實(shí)驗(yàn)，建議初始濃度設(shè)置在200-300 μg/mL之間，再根據(jù)特定的實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行優(yōu)化

血管生成實(shí)驗(yàn)濃度：請(qǐng)務(wù)必使用大于10 mg/mL的Matrigel產(chǎn)品，康寧提供挑選批次和批次預(yù)留的服務(wù)，請(qǐng)您在訂購產(chǎn)品時(shí)向代理商說明您的要求

體內(nèi)皮下注射實(shí)驗(yàn)濃度：由于是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，為了避免成膠不wan全，建議終濃度在4 mg/mL以上。

? 使用Matrigel時(shí)需要注意哪些方面？
所有接觸Matrigel的試劑耗材產(chǎn)品都需要預(yù)冷，操作過程應(yīng)全程在冰上操作，確保低溫環(huán)境。Matrigel對(duì)溫度十分敏感，一旦超過10℃，即開始凝膠。以下圖片可供參考：

? 如何區(qū)別包被和凝膠？
包被指Matrigel濃度小于成膠濃度（即<3 mg/mL），在細(xì)胞培養(yǎng)器皿表面形成薄薄的蛋白層而不凝成膠凍狀物質(zhì)；凝膠指Matrigel濃度大于等于成膠濃度（即≥3 mg/mL），在細(xì)胞培養(yǎng)器皿表面能夠形成膠凍狀物質(zhì)。

康寧基質(zhì)膠代理——天津益元利康生物科技有限公司，為您提供康寧Corning耗材。如移液槍、錐形瓶、48孔板、Matrige基底膜基質(zhì)等實(shí)驗(yàn)耗材，更多產(chǎn)品，歡迎咨詢！